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Frankia are gram-positive, filamentous, nitrogen-fixing actinobacteria that are symbiotic with over 200 

different species of plants.  Frankia  produce three cell types: vegetative hyphae, spores located in 

sporangia, and the unique lipid-enveloped cellular structures, termed vesicles. Vesicles are formed 

inside plant cell nodules, or in culture under nitrogen limiting conditions, and act as specialized structures 

for the nitrogen fixation process.  The mature vesicle is surrounded by an envelope that extends down the 

stalk of the vesicle past the basal septum, which separates the vesicle from the hyphae. Techniques have 

been developed for the isolation and urification of intact vesicles from Frankia grown in culture [1,2,3]. Initial 

investigations on the properties of purified vesicles have focused on nitrogen metabolism [3,4].  Protein 

extraction from vesicles has historically been difficult and a significant bottleneck to proteomic studies 

because vesicles are resilient structures that are difficult to disrupt.  Reliable and comprehensive proteomic 

maps of Frankia hyphae and vesicles can only be assured when proteins are isolated reproducibly and in 

a manner in which they are accuray represented in the downstream analysis.  For example, 2DGE can be 

an accurate representation of a  proteome only  if the entire protein constituency of cells is recovered during 

the sample preparation process. While French press treatment effectively lyses hyphae, it fails to disrupt  

贵谤补苍办颈补&苍产蝉辫;惫别蝉颈肠濒别蝉.&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;笔谤别蝉蝉耻谤别&苍产蝉辫;颁测肠濒颈苍驳&苍产蝉辫;罢别肠丑苍辞濒辞驳测&苍产蝉辫;（笔颁罢）&苍产蝉辫;耻蝉别诲&苍产蝉辫;颈苍&苍产蝉辫;肠辞尘产颈苍补迟颈辞苍&苍产蝉辫;飞颈迟丑&苍产蝉辫;补&苍产蝉辫;蝉辫别肠颈补濒颈锄别诲&苍产蝉辫;濒测蝉颈蝉&苍产蝉辫;谤别补驳别苍迟&苍产蝉辫;

effectively disrupted purified vesicles enabling further investigation of the proteome of the vesicles.